人胰島(dao)素原  (PI)ELISA使用說明(ming)書

胰島素(su)原(yuan)(PI)是胰島素(su)的前體(ti)激(ji)素(su) ， 它(ta)是由由胰島β細胞合(he)成和分泌 ， 主要 在腎臟分解(jie)代謝。生理情況下 ，只有(you)極少量(liang)的胰島(dao)素原釋放入血 ，在(zai)病理情 況下 ，胰島β細(xi)胞釋放胰(yi)島素(su)原增多 ，血中胰(yi)島素原水平升(sheng)高(gao)。 它是細胞在 裂解(jie)成成熟胰(yi)島素之前分泌的(de)最(zui)后一個單鏈蛋白結構(gou)。 它是由芝加哥大學的Donald F. Steiner教授(shou)在1967年發現的(de)。

本試(shi)(shi)劑盒采用雙(shuang)抗體夾心法酶聯免疫吸附試(shi)(shi)驗（ELISA） 。往預先(xian)包(bao)被有人 胰島素原(yuan)(PI)捕獲(huo)抗(kang)體的微孔(kong)中 ，依次(ci)加入樣本(ben)、標準品、生物(wu)素標記的檢測 抗體 ，HRP  酶結(jie)合物 ， 中間經過溫(wen)育和洗(xi)滌 ，用(yong)底物TMB  顯色(se) ，TMB 在過 氧化物酶(mei)(HRP)的(de)催化下轉化成藍色 ，并在酸的作用下轉化成最終(zhong)的(de)黃色。顏色 的深(shen)淺和樣品中的人胰島素原(PI)呈正(zheng)相(xiang)關。用(yong)酶標儀在(zai) 450nm  波長下測定(ding)

吸光度（OD  值） ，計算樣(yang)品濃度。

靈敏(min)度：4.79pg/mL

檢(jian)測范圍：12.5-800pg/mL

特(te)異性(xing)：可(ke)檢測樣本中人的PI ，且與其類似物無明顯交叉反應(ying)。

試劑盒性能：

1.    重(zhong)復(fu)性(xing) ：板內變異系數(shu)小于  10% ，板間變異系數(shu)小于  10%。

2.    回收率 ：在(zai)選取(qu)的健康人血清(qing)、血漿和細胞培(pei)養上清(qing)中加(jia)入  3  個不同

濃(nong)度水(shui)平的人PI ，計(ji)算回收率。

3.    線性稀釋(shi)：分別在(zai)選取的4份健康人血清、血漿和(he)細胞培(pei)養上清中(zhong)加入

高濃度人PI ，在標準曲線動力學范圍內進(jin)行稀(xi)釋 ，評估線性。