大鼠血小板因子4ELISA試劑盒分析檢測
樣本處理及要求
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細胞培養物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍(dong)融。
大鼠血小板因子4ELISA試劑盒分析檢測
需要而未提供的試劑和器材
1. 酶標儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水
實驗結果計算
以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。
1. 試劑(ji)盒從(cong)冷藏環(huan)境中(zhong)取出(chu)應在(zai)室溫(wen)平衡15-30 分鐘(zhong)后方可使用,酶標包被板開封(feng)后如未(wei)用完,板條應裝(zhuang)入(ru)密封(feng)袋中(zhong)保(bao)存。
2. 濃洗(xi)(xi)滌液可能會有結(jie)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫(wen)助溶,洗(xi)(xi)滌時不影響結(jie)果。
3. 各步加樣均應使(shi)用加樣器,并經常校對其準確性,以避(bi)免試驗誤差。一次加樣時(shi)間(jian)控制(zhi)在5 分鐘(zhong)內,如標本數量多,推薦使(shi)用排(pai)槍加樣。
4. 請每次測定(ding)的同時(shi)做(zuo)標準(zhun)曲線,建議做(zuo)復(fu)孔(kong)(kong)。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值(zhi)大于標準(zhun)品(pin)孔(kong)(kong)di一孔(kong)(kong)的OD 值(zhi)),請先用樣品(pin)稀(xi)(xi)釋液稀(xi)(xi)釋一定(ding)倍數(shu)(n 倍)后再測定(ding),計算時(shi)請z后乘以總稀(xi)(xi)釋倍數(shu)(×n×5)。
5. 封(feng)板膜只限(xian)一次(ci)性使用,以避免交(jiao)叉污染。
6. 底物請(qing)避(bi)光保(bao)存。
7. 嚴格按(an)照說(shuo)明書(shu)的操作進行(xing),試驗結果判定必須(xu)以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試(shi)劑不(bu)同批號組(zu)分不(bu)得混用。
10. 試劑盒2-8℃冷藏,保質(zhi)期6個月
郵箱:2450868877@qq.com
傳真:86-區號-傳真號碼
地(di)址:上(shang)海(hai)市(shi)楊浦區鐵嶺路32號1519-10室(shi)