小鼠環磷酰胺ELISA試劑盒洗板方法

樣本處理及要求

1.  血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3.  組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

4.  細胞培養物上清或其它生物標本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應(ying)避免反復凍(dong)融。

小鼠環磷酰胺ELISA試劑盒洗板方法 

需要而未提供的試劑和器材

1. 酶標儀（450nm）

2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

實驗結果計算

以所測標準品的OD值為橫坐標，標準品的濃度值為縱坐標，在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計算出樣品的濃度。

1. 試(shi)劑(ji)盒(he)從冷藏環境中(zhong)取出應(ying)在室(shi)溫(wen)平(ping)衡15-30 分(fen)鐘后方可(ke)使(shi)用，酶標(biao)包被板開封后如未用完，板條應(ying)裝入(ru)密封袋中(zhong)保(bao)存。

2. 濃洗滌液可(ke)能會有結晶析出，稀(xi)釋(shi)時(shi)(shi)可(ke)在(zai)水浴中(zhong)加溫助(zhu)溶，洗滌時(shi)(shi)不影響結果。

3. 各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標準曲線，建議做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD 值大于標準品孔di一孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n 倍）后再測定，計算時請z后乘以總稀釋倍數（×n×5）。

5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污(wu)染。

6. 底物請(qing)避光保存。

7. 嚴格按照說明(ming)書的操作進行，試(shi)驗結果判定必(bi)須以酶標儀讀數為準.

8. 所有樣品，洗滌液和各(ge)種廢(fei)棄物(wu)都(dou)應按傳染物(wu)處理。

9. 本試劑不同(tong)批號組分不得混用(yong)。

10. 試劑盒2-8℃冷藏，保(bao)質期6個月