雞促腎上腺皮質激素ELISA試劑盒分析測定

Elisa試劑盒(he) 性(xing)能:

 1．準確性(xing)：標準品(pin)線性(xing)回歸與預期(qi)濃度相(xiang)關(guan)系數R值，大于(yu)等于(yu)0.9900。

 2．靈敏度：檢(jian)測濃度小于10 pg/ml。

 3．特(te)異性：不(bu)與其它(ta)可溶性結構類似物(wu)交叉反應(ying)。

 4．重復性：板內、板間變異系數均小于(yu)15%。

 貯(zhu)藏：2-8℃，避(bi)光防潮(chao)保存。

 有(you)效(xiao)期(qi)：6個(ge)月

樣本(ben)處理及要(yao)求(qiu)

1.  血清：將(jiang)收集于血清分(fen)離(li)(li)管的全血標本在室溫放置2小時(shi)或(huo)4℃過夜，然后1000×g離(li)(li)心20 分(fen)鐘(zhong)，取上清即可，或(huo)將(jiang)上清置于-20℃或(huo)-80℃保存，但應避(bi)免(mian)反(fan)復凍融。
2.  血漿(jiang)：用EDTA或(huo)肝素作為抗(kang)凝劑采集標本，并將(jiang)標本在采集后(hou)的(de)30分鐘內于2-8℃ 1000×g離(li)心15分鐘，取上清即可檢測(ce)，或(huo)將(jiang)上清置于-20℃或(huo)-80℃保(bao)存(cun)，但應避免反復凍融。
3.  組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組(zu)織(zhi)，去除殘留(liu)血液（勻漿(jiang)中裂解的紅細(xi)胞會(hui)影響(xiang)測(ce)量結果），稱重后(hou)將(jiang)組(zu)織(zhi)剪碎。將(jiang)剪碎的組(zu)織(zhi)與對應體(ti)積(ji)的PBS（一般按(an)1:9的重量體(ti)積(ji)比(bi)，比(bi)如1g的組(zu)織(zhi)樣(yang)品對應9mL的PBS，具(ju)體(ti)體(ti)積(ji)可根據實驗需要適當調整，并做(zuo)好記錄。推(tui)薦在PBS中加入蛋(dan)白(bai)酶抑制劑）加入玻(bo)璃勻漿(jiang)器中，于(yu)冰(bing)上充分研磨。為了進一步(bu)裂解組(zu)織(zhi)細(xi)胞，可以對勻漿(jiang)液進行(xing)超(chao)聲(sheng)破碎，或反復(fu)凍融。后(hou)將(jiang)勻漿(jiang)液于(yu)5000×g離心(xin)5~10分鐘，取上清檢測(ce)。

4.  細(xi)胞培(pei)養物上(shang)清或其它生(sheng)物標本(ben)：請1000×g離(li)心20分鐘(zhong)，取上清(qing)即可檢測，或將上清(qing)置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍(dong)融。

注：標(biao)本溶(rong)血(xue)會影響后檢(jian)測(ce)結果(guo)，因此溶(rong)血(xue)標(biao)本不(bu)宜(yi)進行此項檢(jian)測(ce)。

【樣本收集保存】

　　1、血清：使用不含熱原和(he)(he)內毒(du)素的試管，操作過(guo)程中避免任何細胞刺激，收集(ji)血液后，3000轉離心(xin)10分(fen)鐘將血清和(he)(he)紅細胞迅速小心(xin)地分(fen)離。

　　2、血漿：EDTA、檸(ning)檬酸(suan)鹽或(huo)肝(gan)素抗凝。3000轉離(li)心30分鐘取上(shang)清。

　　3、細胞上清液：3000轉離心(xin)10分鐘去除顆粒和(he)聚合物。

　　4、組織勻(yun)漿(jiang)：將(jiang)組織加入適量(liang)生(sheng)理鹽水搗碎。3000轉離(li)心10分鐘取上清(qing)。

　　5、保存(cun)：如果樣(yang)本收(shou)集后不及時檢測，請按(an)一次(ci)用量分(fen)裝，凍存(cun)于-20℃，避(bi)免反復(fu)凍融(rong)，在(zai)室溫下解凍并確(que)保樣(yang)品均勻地充分(fen)解凍。